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苏州蚂蚁淘生物科技有限公司是一家创新型高科技生物公司，以常规生物学实验外包与生物学试剂为基础，放眼于生命科学领域的前沿技术服务，公司技术骨干有着多年的生物学科研背景，毕业于国内外名牌大学，并且有着丰富的项目经验，了解国内外科研行情，我公司力求为每一个客户提专业、针对性的实验方案。我公司以技术服务为支点，和国内外多家生物试剂公司有着密切的业务往来.公司特色技术服务包括：抗体药物研发、噬菌体抗体库、蛋白表达与传化、抗体制备、高通量测序、组学研究、生物信息学分析与方法建立、基础分子生物学技术外包、化学中间体合成、原料药物研发、论文编写等。我公司秉承”诚信做人，认真做事，服务至上“，希望用我们的专业知识和项目经验为国内科研客户解决科研问题，祝您科研之路畅通无阻！

AP-TAG技术彻底改变了检测和克隆细胞表面受体和配体的方式。本发明的实质是允许将编码任何分泌的多肽配体或受体胞外域的cDNA序列与pAPtag克隆载体中的人胎盘分泌的碱性磷酸酶（AP）框内融合。当在293T或CHO细胞中表达时，所得的配体-AP融合蛋白（称为AP-body）可以高水平分泌到培养基中，因此可以通过AP活性测定或使用抗AP抗体的Western印迹分析轻松检测到。因此，配体-AP或可溶性受体-AP融合蛋白可以像抗体一样用作亲和剂，从而可以最方便，安全和灵敏地检测和克隆其相应的细胞表面受体或配体。

自发明以来，已经通过AP-TAG技术克隆了许多重要的细胞表面受体和配体，包括瘦蛋白，信号蛋白III，Nogo-66，IL-24，果冻肚的受体，以及Kit，Mek4和Sek受体酪氨酸激酶的配体。

genhunter的293T细胞

用于用pAPtag载体转染

293T是通常用于转染测定的人类胚胎肾脏（HEK）细胞系。由于细胞中大量T抗原的表达，具有SV40复制起点的质粒（例如pAPtag-2，pAPtag-4和pAPtag-5）可以被瞬时转染，并能以极高的水平表达AP融合蛋白（例如配体-AP融合蛋白）。因此，我们强烈建议使用该细胞系与pAPtag载体一起生产AP融合蛋白。转染后2-3天，可以通过碱性磷酸酶测定法（请参阅我们的AP测定试剂A，目录号Q501）或使用AP抗体的Western blot轻松监测融合蛋白。但是，为了长期生产AP融合蛋白，我们建议通过与嘌呤霉素或潮霉素抗性质粒（293T对G418抗性）共转染来克隆稳定的细胞系。

GenHunter提供了几种产品为北＆反向Northern杂交：
   -所述HotPrime DNA标记试剂盒用于与放射性标记的dATP差异显示片段的优化标记（目录号H501）。
   - 用于标记用于“反向Northern”印迹的cDNA探针的ReversePrime cDNA标记试剂盒（目录号R701）。

HotPrime DNA标记试剂盒在传统的“随机引物”方法上进行了三项独特的改进，可以对DNA探针进行至少5至10倍的比放射性进行放射性标记。它旨在有效标记从差异展示中分离的cDNA探针，用于Northern或Southern印迹分析以及文库筛选。但是，HotPrime试剂盒还可以将DNA探针标记为具有类似高比活性的任何其他应用。对传统随机引物试剂盒的第一个改进涉及使用随机十聚体而不是六聚体。基于观察到短于9个碱基的引物在启动DNA合成中无效的观察，这确保了任何序列的DNA探针的更有效的引发（Williams等，1991，Nucleic Acids Res。，18：6531-6535）。第二，由于差异显示的cDNA片段相对较短（150-700 bp），因此将锚定的oligo-dT引物掺入标记缓冲液中可确保“全长”反义cDNA探针被标记，从而大大增加了Northern blot或文库筛选的信号检测。第三，利用放射性dATP代替dCTP，可以利用差异显示检测到的mRNA 3'非翻译区的AT富集性质，从而将DNA标记为最高的比活。这大大增加了在RNA印迹或文库筛选中进行信号检测的机会。第三，利用放射性dATP代替dCTP，可以利用差异显示检测到的mRNA的3'非翻译区的AT富集性质，将DNA标记为最高的比活。这大大增加了在RNA印迹或文库筛选中进行信号检测的机会。第三，利用放射性dATP代替dCTP，可以利用差异显示检测到的mRNA 3'非翻译区的AT富集性质，从而将DNA标记为最高的比活。

GenHunter的ReversePrime试剂盒提供了标记cDNA的完整系统，可用于“反向Northern”印迹，对差异显示产生的阳性克隆进行差异筛选。该试剂盒适用于斑点印迹或菌落杂交筛选克隆到PCR-TRAP®克隆系统（货号P404）中的差异显示PCR产物。这种改进显着减少了通过Northern印迹或核糖核酸酶保护试验进行筛查所需的劳动量，并提供了高特异性。它可以准确地从假阳性中识别出阳性，并减少进行差异显示筛选所需的RNA量。

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