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AP-TAG技术彻底改变了检测和克隆细胞表面受体和配体的方式。本发明的实质是允许将编码任何分泌的多肽配体或受体胞外域的cDNA序列与pAPtag克隆载体中的人胎盘分泌的碱性磷酸酶(AP)框内融合。当在293T或CHO细胞中表达时,所得的配体-AP融合蛋白(称为AP-body)可以高水平分泌到培养基中,因此可以通过AP活性测定或使用抗AP抗体的Western印迹分析轻松检测到。因此,配体-AP或可溶性受体-AP融合蛋白可以像抗体一样用作亲和剂,从而可以最方便,安全和灵敏地检测和克隆其相应的细胞表面受体或配体。

自发明以来,已经通过AP-TAG技术克隆了许多重要的细胞表面受体和配体,包括瘦蛋白,信号蛋白III,Nogo-66,IL-24,果冻肚的受体,以及Kit,Mek4和Sek受体酪氨酸激酶的配体。



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genhunter的用于AP融合蛋白的免疫印迹 该试剂盒包含对人胎盘分泌性AP特异的AP抗体(兔多克隆抗体)以及两个针对AP Western印迹的对照。该抗体用于从培养基中分泌的AP融合蛋白的蛋白质印迹分析时,效果最佳。应该注意的是,尽管该抗体对AP融合蛋白的Western印迹检测非常有效,但是由于白蛋白的量相似,因此无法直接从培养基中检测到AP本身(分子量为67 KD)兆瓦 因此,提供了来自人胎盘的纯化的AP和已知的可溶性受体AP融合蛋白作为抗体的阳性对照。另外,该抗体仅识别AP的变性形式。单克隆AP抗体(目录号Q320)可用于需要识别天然形式的应用中。


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