CF染料是一系列水溶性的高效荧光染料,用于可见光和近红外光谱区标记生物分子,尤其是蛋白质和核酸分子。基于新型化
学的突破性进展,Biotium的科学家研发了CF染料,因为下列新颖的特性,使其性能优于其他同类产品,如AlexaFluor染料。
新型罗丹明化学
罗丹明染料以优异的耐光性和良好的荧光量子产量著称。因此很多AlexaFluor染料具有罗丹明核心结构,但是,传统罗丹明的化学结构很难从长波长的荧光染料延伸至远红外区域甚至是更具挑战性的近红外区域,而且生物耦联后其水溶性并不理想。近来,Biotium科学家发现一种制备从绿色到近红外多色荧光的罗丹明染料的新型化学方法。该方法被有效的应用于CF染料的产品中,尤其是远红外CF染料,而且通过这种方法制备的染料不仅水溶性极佳而且耐光性极好。
卓越的近红外染料
近红外染料zui大的特点是比可见光范围要大很多,大滴的染料常会导致染料水溶性低、染料聚合体多、荧光量子产量差等问题。
为了解决这些问题,许多商用的近红外染料比如AlexaFluor、DyLightdyes和IRDyes近红外染料,在制备时吸附了大量的带负电荷的磺化基团,其磺化作用可以在一定程度上会提高染料的溶解性和荧光性,但这样也带来了另一些更加严重的问题,经这种染料标记的生物耦联物的非特异性结合。例如:与大量负电荷结合后可以显著的改变抗体的等电点,进而影响抗原抗体的特异性结合反应。综合以上内容,Biotium的科学家用革命性的方法设计出近红外染料CF,在避免引入大量负电荷的情况下,极大的保证了染料优异的理化特性Biotium近红外的CF染料以花青或罗丹明染料为核心结构,该核心结构的特殊化学修饰限制了染料的分子内位移,从而获得染料的高量子产率和更好的水溶性。因此,近红外CF染料比其他近红外染料荧光强度更高,光稳定性好。zui重要的是,在免疫印迹实验上应用近红外CF染料标记蛋白质样品相对于其他商业用近红外染料制备的抗体偶联物,zui大限度的提高了信噪比。

图1.用CF633Mix-n-Stain标记的抗微管蛋白抗体和CF488A鬼笔环肽染色的海拉细胞.
优异的标记效率
生物耦联反应的活性染料一般很容易水解,会在运输,操作及储存中带来诸多不便,zui终导致染料结合效率低下。像AlexaFluordyes,DyLightdyesandIRDyes等严重的磺化作用有较强的吸湿性,恶化水解作用等问题。例如:AlexaFluor488在应用时琥珀酰亚胺脂酯SE活性部分远低于50%(AlexaFluor488微量标记试剂盒产品信息,Invitrogen)。相反,所有Biotium的CF染料具有相对稳定的胺活性的SE基团型,这比大部分AlexaFluor染料的SE更耐水解。总体来说,CF染料SE产品一贯的给出更高的标记效率,提供给用户更好的使用价值。
Mix-n-Stainantibodylabelingtechnology
Biotium利用CF染料已成功研制出一种突破性的混合即染--Mix-n-Stain抗体标记试剂盒。您只需混合试剂盒中选择的抗体,CF染料及相应的反应缓冲液等,就可以在30分钟内得到CF染料高效标记的抗体耦联物用于免疫组化等实验。这种标记技术为多色免疫组化等提供了空前的方便,例如解决了一些当预标记的*抗体得不到或者由于不同抗体间的相互作用,通过预标记第二抗体的间接荧光印迹无法实现等情况。Biotium目前提供18种CF染料,还有更多颜色的染料在开发之中。CF染料系列产品包括活性CF染料,标记试剂盒,二抗标记试剂盒和联袂抗生素蛋白的CF标记染料和更多CF标记的生物分子。
