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InvivoGen的激动分享TLR9的激动剂CpG ODNs

InvivoGenCpGODNs 优势
· 涵盖最全的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)或细菌DNA
· 生物学活性检测
· 随产品提供去内毒素水
· 高溶解度
CpGODNs 是合成的单链DNA短片段,含有特定的非甲基化CpG二核苷酸序列。CpGODNs含有部分或全部磷硫酰骨架(phosphorothioated(PS)backbone)。与细菌基因组DNA的磷酸二酯骨架相对(phosphodiester(PO)backbone)。
三个主要刺激性CpGODNs的分类,是基于其结构特性与在人外周血单核细胞(PBMC),某些B细胞和 类浆树突细胞(pDC)的活性而划分。三类CpGODNs是ClassA(TypeD),ClassB(TypeK) 和ClassC。



ClassesofCpGODNs
-CpG-AODNs 以含有CpG回文序列为中西的PO骨架和PS修饰的3’端poly-G链构成。CpG-AODNs刺激类浆树突细胞(pDC)可以较强的产生IFN-a,但是会较弱的激活TLR9依赖的NF-kB信号通路,产生较少的促炎性细胞因子(如白细胞介素6)。
-CpG-BODNs 是包含一个或多个CpG二核苷酸的完整PS骨架结构序列。CpG-BODNs可以较强的活化B细胞和TLR9介导的NF-kB信号,但刺激分泌IFN-a的效果较弱。
-CpG-CODNs 结构是ClassA和B的混合体。它包含了完整的PS骨架和CpG回文序列。CpG-CODNs可以较强的引起pDC分泌IFN-a,在刺激B细胞时也可以得到较好的效果。
ClassA
ClassA(typeD)CpGODNs(CpG-AODNs) 以含有CpG回文序列为中西的PO骨架和PS修饰的3’端poly-G链构成。
PolyG 末端在分子间形成四分体,从而产生高分子量结构。这样的结构增强了稳定性与内涵体的胞内转运,促使大量IFN-a的产生和pDCs的成熟。
CpG-AODNs也是NK细胞的强活化剂,其作用是通过间接的细胞因子信号来达到活化效果。
BallasZK.etal.,1996.InductionofNKactivityinmurineandhumancellsbyCpGmotifsinoligodeoxynucleotidesandbacterialDNA.JImmunol.157(5):1840-5. KrugA.etal.,2001.IdentificationofCpGoligonucleotidesequenceswithhighinductionofIFN-alpha/betainplasmacytoiddendriticcells.EurJImmunol.31(7):2154-63. VerthelyiD.etal.,2001.HumanperipheralbloodcellsdifferentiallyrecognizeandrespondtotwodistinctCPG motifs.JImmunol.166(4):2372-7.

 
ClassACpGODNs 刺激 HEK-Blue™hTLR9 细胞(货号:hkb-htlr9)
用不同浓度的A-classCpGODNs,ODN1585,ODN2216 或 ODN2236及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™hTLR9 细胞(表达人源TLR9和NF-κB诱导 SEAP 报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
 

 
ClassACpGODNs 刺激 HEK-Blue™mTLR9 细胞(货号:mkb-htlr9)
用不同浓度的A-classCpGODNs,ODN1585,ODN2216 或 ODN2236及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™mTLR9 细胞(表达鼠源TLR9和NF-κB诱导 SEAP 报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
ClassB
ClassB(typeK)CpGODNs(CpG-BODNs)是18-28摩尔的线性脱氧寡核苷酸。CpG-BODNs 是包含一个或多个6摩尔CpG二核苷酸的完整PS骨架结构序列。人源的最佳序列是GTCGTT[1],鼠源的最佳序列是GACGTT[2]。
CpG-BODNs是B细胞和NK细胞的强刺激剂,对于IFN-a分泌的刺激效果却较弱[3,4]。CpG-BODNs表现出较好的抗肿瘤效果以及Th1型佐剂的活性。
 HartmannG&KriegAM.,2000.MechanismandfunctionofanewlyidentifiedCpGDNAmotifinhumanprimaryBcells.JImmunol.164(2):944-53. 2-KriegAM.etal.,1995.CpGmotifsinbacterialDNAtriggerdirectB-cellactivation.Nature.374(6522):546-9. 3-HartmannG.etal.,2000.DelineationofaCpGphosphorothioateoligodeoxynucleotideforactivatingprimateimmuneresponsesinvitroandinvivo.JImmunol.164(3):1617-24. 4-GürselM.etal.,2002.DifferentialandcompetitiveactivationofhumanimmunecellsbydistinctclassesofCpGoligodeoxynucleotide.JLeukocBiol.71(5):813-20.
 



ClassBCpGODNs 刺激 HEK-Blue™hTLR9 细胞(货号:hkb-htlr9)
用不同浓度的B-classCpGODNs,ODN1668,ODN1826,ODN2006 或 ODN2007及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™hTLR9 细胞(表达人源TLR9和NF-κB诱导 SEAP 报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
 

 
ClassBCpGODNs 刺激 HEK-Blue™mTLR9 细胞(货号:mkb-htlr9)
用不同浓度的B-classCpGODNs,ODN1668,ODN1826,ODN2006 或 ODN2007及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™mTLR9 细胞(表达鼠源TLR9和NF-κB诱导 SEAP 报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
ClassC
ClassCCpGODNs(CpG-CODNs)结构是ClassA和B的混合体。它包含了完整的PS骨架和CpG回文序列。
C-ClassCpGODNs可以较强的引起pDC分泌IFN-a,在刺激B细胞时也可以得到较好的效果。C-ClassCpGODNs是很强的Th1-诱导性佐剂。
VollmerJ.etal.,2004.CharacterizationofthreeCpGoligodeoxynucleotideclasseswithdistinctimmunostimulatoryactivities.EurJImmunol.34(1):251-62.





ClassCCpGODNs 刺激 HEK-Blue™hTLR9 细胞(货号:hkb-htlr9)
用不同浓度的C-classCpGODNs,ODN2395 或 ODNM362及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™hTLR9 细胞(表达人源TLR9和NF-κB诱导 SEAP报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
 



ClassCCpGODNs 刺激 HEK-Blue™mTLR9 细胞(货号:mkb-htlr9)
用不同浓度的C-classCpGODNs,ODN2395 或 ODNM362及相应的对照ODNs 刺激HEK-Blue™mTLR9 细胞(表达鼠源TLR9和NF-κB诱导 SEAP报告基因, 刺激物与HEK-BlueDetection试剂共孵育24 小时,NF-ΚB-诱导 SEAP的水平在OD655nm检测。
 
正确选择ODN类型

 
Class A CpG ODNsClass B CpG ODNsClass C CpG ODNs
应用:应用:应用:
刺激 pDCs刺激 B 细胞混合CpG A和CpG B的功能
诱导 IFN-a 产生活化NF-kB 
 疫苗佐剂 
产品:产品:产品:
ODN 2216 (human preferred)ODN 1826 (mouse)ODN 2395 (human/mouse)
ODN 1585 (mouse)ODN 1668 (mouse)ODN M362 (human/mouse)
ODN 2336 (human preferred)ODN 2006 (human preferred) 
 ODN BW006 (human/mouse) 
 ODN 2007 (Bovine/porcine) 
 ODN D-SL01 (Multispecies) 


 
ClassBackboneB cellspDCsIFN-αIl-6
APS-PO++++++++++
BPS++++++++++++
CPS+++++++++++


 
ODN的品质经专业的实验室检测,并发表文献






绿字部分:实验结果表明,从InvivoGen购买的CpG-C, 不同批次的产品刺激细胞并产生IgG的效果均一稳定,而从Sigma 和Coley购买的产品活性则非常不连续




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