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Gentarget蛋白表达

大肠杆菌的表达和纯化 

GenTarget专有的Fusion in vivo PCR  克隆技术  为我们提供了将目标蛋白克隆到我们优化表达载体中的优势。我们的  自动诱导培养基  为我们提供了表达的无忧诱导方案。而如果所表达的蛋白质是非常TOXI ç,或主要表达在包涵体中,我们将使用我们的自紧式控制克隆细胞。具有His标签的表达蛋白将通过亲和层析纯化。请  与我们联系  以获取服务报价。  

哺乳动物悬浮液的表达和纯化: 

利用GenTarget  先进的慢病毒载体系统,我们将您的靶标克隆到带有His标签的慢病毒载体中,生成表达慢病毒颗粒,并将其转导到哺乳动物悬浮细胞中进行表达。在抗生素选择压力下,只有被转导的细胞才能生长并表达目标蛋白。这种受控的半稳定细胞系表达系统显示出高蛋白表达水平,而实际上并未构建稳定的细胞系。使用慢病毒系统的好处在于,慢病毒颗粒在悬浮细胞中的转导率最高,可以很容易地产生大量目标表达细胞。这是以非常低的成本获得哺乳动物表达蛋白的好方法!His标记的表达蛋白将通过亲和层析纯化。


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Gentarget增强型超级CMV启动子介绍RNA聚合酶II  是驱动数千种基因表达的主要启动子类别,其转录机制已得到广泛研究。它涉及许多转录因子和顺式调控DNA元件的组合阵列。已经很好地表征了两种转录起始复合物:核心启动子和共调节子。的核心启动子被定义为连续DNA序列的最小拉伸足以通过RNA转录的直接准确起始聚合酶II。协同调节因子是其他顺式作用的DNA序列,包括近端启动子,增强子,沉默子和边界/绝缘子元件。的核心启动子延伸的上游或为〜37bp在转录起始位点,其中包括BBE(TFIIB识别元件),TATA盒,INR(引发剂),和DPE(下游启动子元件)(见下文示意性地图,珍2002下游)。共同调节子:近端启动子是转录起始位点紧邻的区域(大约从-250到+250 nt)。转录增强子和阻遏子的结合位点可位于距转录起始位点许多kbp的位置,并起激活或抑制转录作用。什么是增强型超级CMV启动子?GenTarget经过对多聚体II启动子进行比对后,设计了野生型CMV启动子区域,并在上游增强子Inr和DPE内部进行了一系列突变。我们通过研究以下方面,筛选了重新设计的CMV启动子的效率:所述的性能  增强剂  在上游调节区域TATA  包装盒的必要性 增加转录效率所需的DPE量  效果  间隔长度  的转录起始位点和翻译起始位点之间一个的效果内含子  在下游调控元件 选择具有最强转录/翻译效率的工程超级CMV启动子,并将其整合到我们的慢病毒载体和Eco-PCR克隆表达载体中。我们专有的suCMV启动子具有:其增强子区域有6个突变核心启动子区域内的3个突变转录和翻译起始位点之间的优化间隔区距离转录位点下游的人工内含子 


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