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Addgene正在为我们收集的200多个质粒提供克隆级DNA(cgDNA)。以这种格式可获得的质粒包括多种流行的质粒和具有高克隆潜力的主链。通过将这些质粒以cgDNA的形式提供,我们希望帮助希望从Addgene那里获得质粒后立即开始克隆的科学家-消除了当人们在细菌刺中接受质粒时所需的扩增和提取步骤,从而缩短了实验时间。


Addgene腺相关病毒(AAV)是最初被发现为腺病毒原种污染物的小型病毒。使用AAV进行研究的一个主要优点是它受复制限制,通常不引起人类疾病。由于这些原因,AAV通常以较低的生物安全水平被包含并且在体内引起相对较低的免疫学作用。虽然AAV可以在BSL-1处理,但表达癌基因或毒素的AAV应该在BSL-2处理。


AAV可以以低免疫应答和低毒性转导分裂和非分裂细胞。尽管重组AAV不能整合到宿主基因组中,但转基因表达可以长期存在。目前,AAV的实用性受到其小包装容量(包括ITR在内约4.5 kb)的限制,尽管有很多兴趣和精力来扩大这种容量。


传统上,AAV需要存在另一种“辅助”病毒(例如腺病毒或疱疹病毒)才能传播。这是由于AAV对某些介导AAV复制的外源基因产物的依赖。“无辅助病毒的系统”已经绕过了这一要求,该系统无需使用辅助病毒就可以生产感染性AAV颗粒。替代地,可以在AAV生产过程中通过辅助质粒(例如pHelper)和特异性包装细胞系(例如HEK293细胞)提供特异性基因产物。



对于希望使用质粒的科学家,addgene提供了一个可搜索的高质量质粒数据库、集合库和质粒工具包,价格合理。AddGene储存库中的所有质粒都是为了进行质量控制而进行排序的,并且从它们到达我们的工厂到它们被打包装运,都用条形码进行跟踪。科学家可以通过addgene的在线系统请求质粒。截至2016年,addgene还为科学家提供常用质粒的AAV和慢病毒制剂。

 



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