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worthington-biochem授 Worthington厂家

WorthingtonX品牌 历史介绍:苏州蚂蚁淘生物科技有限公司,作为一家生命科学领域的高科技生物公司,目前代理销售二十多家欧美著名生物技术公司的产品,覆盖了免疫学、细胞生物学、分子生物学、药物筛选、生物制药、食品检测、疫苗生产等领域。


Worthington术语生物化学物质可以指作为活细胞组成部分的任何化合物。沃辛顿(Worthington)纯化的主要生物化学物质是从牛胰,植物,发酵来源和其他天然物质等材料中获得的蛋白质。

酶是充当催化剂的蛋白质。生活的每个方面都涉及化学反应。吃饭时,淀粉被分解成简单的糖。来自肉或蛋的蛋白质分解成组成该蛋白质的简单氨基酸。这些反应都不会在您的体内自发发生。进行各种反应都需要催化剂,而酶是生物体使用的催化剂。

酶用于医学研究。一个例子是使用称为胶原酶的酶溶解组织。任何器官的所有细胞都被称为胶原蛋白的蛋白质束缚在一起。如果科学家希望研究一种特定类型的细胞,则可以获取组织样本,将其浸入胶原酶溶液中,经过一段时间后,所有细胞都将彼此分离,但是每个细胞都会仍然活着并正常运转。现在,科学家可以在培养皿中“种植”单个细胞之一并添加一些营养。如果选定的细胞没有被损坏,它将一遍又一遍地分裂,直到形成由原始细胞的许多副本组成的新组织。该操作称为“组织培养”。



Worthington木瓜蛋白酶

IUB:3.4.22.2
C.AS:9001-73-4

酶促反应 (图像将在新窗口中打开)

木瓜蛋白酶是一种半胱氨酸水解酶,在多种条件下均稳定并具有活性。即使在高温下,它也非常稳定(Cohen等, 1986)。番木瓜番木瓜的乳胶是四种半胱氨酸内肽酶的丰富来源,其中包括木瓜蛋白酶,糜蛋白酶,甘氨酰内肽酶和番木瓜素。这些蛋白质被合成为无活性的前体,在植物受伤和排出乳胶后两分钟内就具有活性。木瓜蛋白酶是次要的成分,但是由于更容易纯化,因此已被广泛研究(Azarkan 2003)。

历史:

1873年,GC Roy在加尔各答医学杂志上发表了一篇题为“木瓜汁对食物中含氮物品的溶剂作用”的文章,首次研究了木瓜蛋白酶的作用木瓜蛋白酶于19世纪末由Wurtz和Bouchut首次命名,他们从木瓜的汁液中部分纯化了该产品(Menard和Storer 1998)。命名时,它被简单地认为是热带木瓜果实乳胶中的蛋白水解活性成分(Wurtz和Bouchut 1879)。

在整个1950年代中期和1960年代中期,纯化和分离技术得到了极大的改善,并且分离出了纯木瓜蛋白酶。木瓜蛋白酶的研究为理解酶作为蛋白质提供了很大的进步。1968年,木瓜蛋白酶是第二种结晶的酶,其结构通过X射线方法确定。木瓜蛋白酶是第一个鉴定出其结构的半胱氨酸蛋白酶(Drenth et al。1968 )。

在1980年代,对活动场所的几何形状进行了审查,并确定了三维结构的分辨率为1.65埃(Kamphuis等, 1984)。木瓜蛋白酶的前体和抑制剂在1990年代被广泛研究(Vernet等, 1991)。

今天的研究旨在进一步了解特异性(Portaro等, 2000)和抑制剂,低pH,金属离子和氟化醇带来的结构扰动(Alphey和Hunter,2006; Huet等, 2006; Kaul等, 2002)。 ,Naeem et al。2004)。

特异性:

木瓜蛋白酶具有相当广泛的特异性。它具有内肽酶,酰胺酶和酯酶活性。活性位点包含七个亚位点(S 1 -S 4和S 1' -S 3'),其可以各容纳一个氨基的基板的酸残基(P 1 -P 4和P 1' -P 3')(谢克特和伯格(1967)。特异性由S 2亚位点控制,S 2亚位点是容纳底物P 2侧链的疏水口袋木瓜蛋白酶显示出特定的底物偏爱性,主要是针对该亚位点上的大量疏水或芳香残基(Kimmel和Smith,1954)。2以外 对于亚位点偏好,在活性位点内缺乏明确定义的残基选择性。

分子特性:

所有木瓜蛋白酶的成熟形式都在212至218个氨基酸之间,并表现出很强的同源性(Azarkan 2003)。X射线结构分析表明它们采用相同的三维折叠(Pickersgill 等,  1991; O'Hara 等,  1995; Maes 等, 1996)。

木瓜蛋白酶是作为酶原而合成的,具有133个氨基酸的N端区域,而不是活性酶的一部分(Cohen 等人,  1986年)。木瓜蛋白酶前体基因prepropapain已被克隆并部分或整体表达(Cohen 等人 1986和Choudhury 等人2009)。 

组成:

木瓜蛋白酶是具有三个二硫键和一个酶活性必需的巯基的单链多肽。木瓜蛋白酶被表示为无活性的前体,propapapain。活性木瓜蛋白酶的形成需要几个切割步骤,包括首先切割18个氨基酸的前区(信号序列),然后进一步切割糖基化的114个氨基酸的前区(Vernet 等,  1995)。该前区用作内在的抑制剂和折叠模板。有关更多详细信息,请参见Revell 等。 1993,泰勒 等。 1992年,和Cohen 等人1990年。 

蛋白质登录号:  P00784

CATH分类(v。3.2.0): 

  • 类:Alpha Beta

  • 建筑:Alpha-Beta建筑群

  • 拓扑:组织蛋白酶B;链A

分子量: 

  • 23.4 kDa(理论值)

最佳pH值:  6.0-7.0

等电点:

  • 8.88(理论上)

消光系数: 

  • 53,610 cm -1 M -1  (理论值)

  • 1%,280 = 22.88(理论值)

活动站点残留:

  • 半胱氨酸(C158)

  • 组氨酸(H292)

  • 天冬酰胺(N308)

激活剂:

  • 半胱氨酸

  • 硫化物和亚硫酸盐

  • 重金属螯合剂,如EDTA

  • N-溴琥珀酰亚胺

(White and White 1997) 

抑制剂:

  • 永磁同步电机

  • TLCK,TPCK

  • ALPH 2巨球蛋白

  • 2+和其他重金属

  • 原子能机构

  • 止痛药

  • 胱抑素

  • E-64

  • 亮肽素

  • 巯基粘合剂

  • 羰基试剂

  • 烷基化剂

         (White and White 1997)

 应用范围:

  • 细胞分离,其中它比其他蛋白酶更温和的(:皮层神经元,视网膜,和平滑肌)

  • 蛋白质结构研究,肽图分析

  • 红细胞表面修饰,用于抗体筛选或鉴定

  • 从IgG和IgM抗体制备Fab

  • 整合膜蛋白的溶解

  • 由纯化的蛋白聚糖生产糖肽

  • 酶创清创术



Worthington沃辛顿家族的第三代人积极参与这项业务,并继续将其努力和资源专用于公司及其产品系列的发展。沃辛顿(Worthington)有几种无动物源(AOF)的新产品,包括STEMxyme®胶原酶/中性蛋白酶混合物, 肌红蛋白新等级的B和C型胶原酶

其他经过使用测试的细胞分离试剂盒:


特色产品:




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