【求助】小鼠肝原代

各位，最近采用胶原酶法消化小鼠肝组织提取肝原代细胞，出现问题，请帮忙分析一下：

1.提取肝原代数量很少

2.细胞状态不好

我的操作

1.使用sigma 鼠尾胶原包被培养皿，无菌取组织后剪碎1mm3
2.IV型胶原酶（1mg/ml）按体重约33g小鼠的肝组织：5mg 酶（37度 20min，震荡）
3.DMEM/LOW GLOUSE +10%FBS 培养

4.24h后换液

请问有什么问题么？

怎么没人关注啊？大家没有做小鼠肝原代？

现在一般都是用两步灌流法，你这种方法早就不用了

我现在在做大鼠原代肝细胞··存活率好低啊··未来也准备做小鼠的·希望多交流啊！luxuan0206@sina.com