1. 再好好看一下你的抗体说明书,有些一抗是有WB和组化用的区别的,虽然一般情况下两者都是可以通用的,但是以防万一你的这个比较特殊,建议你好好将抗体说明书重新读一读;2. 检查抗体的使用时是否严格操作,包括抗体稀释液什么的,尤其是稀释液的PH,以及推荐的稀释度、孵育时间和孵育温度等等;还要注意一下一抗、二抗是否相配;以上两个只是回顾或者再审视,如果两者都没有问题,建议你做如下的一点小工作:3. 把你的蛋白取1ul或者2ul直接点在NC膜上,做点杂交实验,一抗、二抗可以按照不同的浓度,注意用一个原浓度的,尤其是一抗的;如果这样有结果,那就是转膜的问题了;如果这个还是不可以,那就换一抗吧……
虽然你没图,但我想多半是一抗不work,换抗体吧。 Santa的抗体做成这样,不奇怪。
又是satan的抗体啊!这种抗体是国产抗体里面最差劲的抗体