2014年7月24日FluoroSpot荧光免疫斑点实验,FluoroSpot荧光免疫斑点实验可用于单细胞水平上检测多种细胞因子的分泌。和ELISpot一样,是一种灵敏、操作简单的方法。在FluoroSpot...
摘要:AlphaInnotech公司近日宣布已经与通用电气医疗集团(GEHealthcare)签订了五年期的战略供应商联盟协议。这项协议是2005年4月两家公司签订的OEM协议的延伸及扩展。
AlphaInnotech公司近日宣布已经与通用电气医疗集团(GEHealthcare)签订了五年期的战略供应商联盟协议。这项协议是2005年4月两家公司签订的OEM协议的延申和扩展。
根据协议的条款,AlphaInnotech将继续开发、制造和供应一整套特有的成像仪器给GEHealthcare。这些产品将以GE的品牌在全世界生命科学研究和药物开发市场上出售。
AlphaInnotech公司市场及业务拓展部副总裁SiaGhazvini表示:“在过去的三年里,我们与GEHealthcare建立了十分密切的关系,很高兴我们的合作会扩展到生命科学的成像领域。GEHealthcare的技术遍布全世界的生物应用领域,再加上AlphaInnotech在成像技术的专业技能,我们将为研究者提供综合全面的产品。”
GEHealthcare公司的采购经理RonAlves表示:“我们也很高兴能与AlphaInnotech延申合作关系,并与他们协作提供尖端的成像系统并开发出新一代的产品。我们两家公司的合作扩展了我们的成像产品线,并为研究者提供了更广泛的选择。”
关于AlphaInnotech公司
成立于1992年的AlphaInnotech公司,是开发、制造和销售电子成像和分析系统的领先者,已有在生命科学研究和药物开发市场上出售了超过1万台产品。我们的目标是结合仪器、试剂和生物信息学软件,为功能基因组学、蛋白质组学和细胞分析提供综合的技术平台。我们的客户包括全球的制药及生物技术公司,以及大学、医院和政府研究机构。有关AlphaInnotech的更多信息,请访问:www.alphainnotech.com
FluoroSpot荧光免疫斑点实验可用于单细胞水平上检测多种细胞因子的分泌。和ELISpot一样,是一种灵敏、操作简单的方法。在FluoroSpot实验中,不同细胞因子的单抗混合物用到了夹心法中。不同于ELISpot,FluoroSpot使用的是荧光标记的检测试剂。一种分析物用生物素化抗体检测,另外一种分析物使用tag标记的抗体检测。这种实验方法的设计保证了可以在同一孔内进行2种细胞因子的检测。接下来使用红色荧光标记的Streptavidin和绿色荧光标记的抗tag抗体进行信号的级联放大。使用自动荧光读板仪分析产生的2种颜色的荧光斑点并生成图像。图像叠加后上显示在相同位置的荧光斑点表示为同时分泌2种细胞因子的细胞。
图1 FluoroSpot检测原理 图2 白色念珠菌提取物处理和未处理的PBMC细胞(300,000
cells/well)过夜培养后,使用FluoroSpot检测分泌 IFN-γ 和 / 或IL-22的细胞。使用AID (Autoimmun Diagnostika GmbH)
公司的iSpot分析仪进行斑点分析。在FITC (IFN-γ) 和 Cy3
(IL-22)叠加图片上相同位置显示的斑点表示为同时分泌IFN-γ
和 IL-22的细胞。
FluoroSpot试剂盒信息 人FluoroSot试剂盒 产品名称 编号 供应商 Human IgG/IgA FluoroSpot kit FS-05R06G Mabtech Human IgG/IgM FluoroSpot kit FS-05R17G Mabtech Human IgG/IgA/IgM FluoroSpot kit FS-050617 Mabtech Human IFN-γ/Granzyme B FluoroSpot kit FS-0110 Mabtech Human IFN-γ/Granzyme B FluoroSpot kit, pre-coated FSP-0110 Mabtech Human IFN-γ/IL-2 FluoroSpot kit FS-0102 Mabtech Human IFN-γ/IL-2 FluoroSpot kit, pre-coated FSP-0102 Mabtech Human IFN-γ/IL-5 FluoroSpot kit FS-0108 Mabtech Human IFN-γ/IL-13 FluoroSpot kit FS-0104 Mabtech Human IFN-γ/IL-17A FluoroSpot kit FS-0103 Mabtech Human IFN-γ/IL-22 FluoroSpot kit FS-0118 Mabtech Human IL-1β/GM-CSF FluoroSpot kit FS-1215 Mabtech Human IL-1β/IL-6 FluoroSpot kit FS-1213 Mabtech Human IL-1β/IL-12/-23 (p40) FluoroSpot kit FS-1214 Mabtech Human IL-1β/TNF-α FluoroSpot kit FS-1209 Mabtech Human IL-6/GM-CSF FluoroSpot kit FS-1315 Mabtech Human IL-6/IL-12/-23 (p40) FluoroSpot kit FS-1314 Mabtech Human IL-6/TNF-α FluoroSpot kit FS-1309 Mabtech Human TNF-α/GM-CSF FluoroSpot kit FS-0915 Mabtech Human TNF-α/IL-12/-23 (p40) FluoroSpot kit FS-0914 Mabtech 猴FluoroSot试剂盒 Monkey IgG/IgA FluoroSpot kit FS-05R24G Mabtech Monkey IFN-γ/IL-2 FluoroSpot kit FS-2122 Mabtech 小鼠FluoroSot试剂盒 Mouse IFN-γ/IL-2 FluoroSpot kit FS-4142 Mabtech Mouse IFN-γ/IL-5 FluoroSpot kit FS-4143 Mabtech Mouse IFN-γ/IL-17A FluoroSpot kit FS-4144 Mabtech
*注意事项
1. 使用抗CD28抗体对CD28共刺激,可以提高IL-2的分泌
在FluoroSpot实验中,捕获抗体对细胞因子的捕获可能会影响细胞因子的分泌。板孔里包被的IL-2捕获抗体能够降低游离IL-2的分泌,而游离IL-2对T细胞活化是必须的。为了补偿这种影响,可使用抗CD28单抗进行共刺激,在合适的浓度下可以增加特异性抗原的分泌而不会增加自然分泌。其他细胞因子也有可能会受到捕获抗体的影响,因此使用抗CD28抗体刺激在很多情况下可以有效的解决这个问题。
2.建议使用带分离滤光片的自动读板仪分析
建议使用带FITC和Cy3滤光片的自动荧光ELISpot分析仪仪分析FluoroSpot。为了准确的检测2种细胞因子分泌的细胞,分析仪需要具有对2种滤光片获得的信号进行叠加分析的能力。