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公司旨在为客户提供高质量的实验外包服务(CRO服务),包括实验方案设计,常规基因工程实验操作,重组蛋白表达与纯化,重组抗体制备,天然蛋白分离与纯化,病毒分离培养等免疫学相关技术服务;同时我们也为工业客户提供部分IVD级别抗体和抗原原料。核心平台:---噬菌体抗体展示技术平台苏州蚂蚁淘生物科技有限公司利用自有的噬菌体(M13,T7噬菌体)展示技术平台,能够为客户提供极具性价比的重组Vhh抗体(纳米抗体/驼类纳米抗体)制备方案,包括动物免疫,文库建立,文库筛选以及重组抗体的体外表达等。---抗体工程技术平台卡梅德生物科技的抗体工程平台包含单克隆抗体制备服务平台,多克隆抗体制备服务平台,抗体测序与改造平台。单克隆抗体制备平台:基于杂交瘤技术的小鼠单抗技术平台,最快能够在2-3个月获得高亲和力与高特异性的单克隆抗体,同时基于噬菌体展示技术,我司能够制备多物种的重组单克隆抗体,包括小鼠,兔子,骆驼,羊驼以及人单抗。多克隆抗体制备服务平台:能够为客户提供兔多抗,羊多抗,骆驼类多抗,牛多抗等多物种的抗体制备服务,根据不同的抗原类型,来自蚂蚁淘生物的资深抗体专家会为您量身定做适合您需求的方案,以满足您的项目要求并节省您的宝贵时间。抗体一级序列测序平台:为满足大量客户对抗体基因序列与氨基酸序列信息的需求,我们为客户提供De Novo抗体全长氨基酸序列解析和N端测序服务;同时我们设计积累多达80种杂交瘤抗体基因测序引物。抗体改造技术平台:蚂蚁淘生物技术的抗体改造平台包括嵌合抗体制备,抗体亲和力成熟以及抗体人源化服务。目前我们已经成功制备十几例嵌合抗体与人源化抗体,均成功交付。---蛋白表达与纯化服务技术平台蚂蚁淘生物科技目前拥有四大蛋白表达平台,能为客户提供全面且优质的蛋白表达技术服务。哺乳动物表达平台:目前公司拥有Freestyle CHO,Expi CHO,CHO-DG44,HEK293F,Vero等细胞系用于蛋白表达制备。公司秉承质量优先原则,全部统一采用Gibco细胞培养基和相关转染配套试剂,以保证每个批次的哺乳动物细胞蛋白表达产品高质量、高表达水平的交付。同时公司拥有的表达载体体系,远高于市面常用蛋白表达载体,能够为客户提供高纯度蛋白。昆虫细胞表达平台:目前公司常采用的昆虫表达细胞为SF9,配套使用的是来自Gibco的培养基,只...


我们很高兴地宣布 PhosphoSolutions 的创始人兼首席执行官 Michael Browning 博士被任命为享有盛誉的 2020 年 CiteAb 终身成就奖的获得者。该奖项突出了一位在试剂领域产生重大影响的杰出人士。

在长达四年的职业生涯中,布朗宁博士作为模范神经科学家、导师和商业领袖为科学发现事业服务。

他无懈可击的诚信和对科学严谨性的奉献激励了无数研究生、博士后和员工,并在试剂行业树立了卓越标准。

Browning 博士为研究界贡献可靠抗体的使命始于 1980 年代他在诺贝尔奖获得者 Paul Greengard 博士在耶鲁大学的实验室的博士后期间。在研究突触蛋白在突触功能中的关键作用时,他亲眼目睹了抗体质量与杰出研究成果之间的联系。

作为科罗拉多大学药理学和神经科学系教授,Browning 博士开发了针对 LTP 所涉及蛋白质的抗体,LTP 被广泛认为是学习和记忆的关键细胞机制。

迈克在 Phospho 的实验室

1990 年代初期,美国国立卫生研究院 (NIH) 认可布朗宁博士对抗体作为研究工具的理解,并授予他开发其他新型抗体的资助。随后的许多出版物都引用了他的本土抗体,NIH 敦促他将他的工作商业化——从而开发了 PhosphoSolutions。

由于多克隆抗体的多功能性和稳定性,布朗宁博士长期以来一直是多克隆抗体的支持者。在出现“重现性危机”之前,他是倡导试剂重现性的行业领导者。2006 年,在他的指导下,PhosphoSolutions 发起了一项行业内独一无二的血清汇集计划,只有在大量血清被积聚、阳性筛选然后汇集后才会释放抗体。这种做法保证了从同质起始材料中纯化的给定抗体的 20 年供应,几乎没有批次间的差异。

认识到 Browning 博士在可重复性方面的领导地位,GBSI 邀请他参加其具有里程碑意义的 2016 年抗体验证研讨会,Browning 博士呼吁抗体制造商采用血清混合并改进和标准化内部验证。

2019 年 9 月,Browning 博士加入了 PhosphoSolutions with Antibodies Incorporated 和 Aves Labs,组成了一个小型制造商家族,提供研究人员可以依赖的试剂。

Browning 博士有一个妻子和两个成年儿子。在业余时间,他喜欢打高尔夫球并与家人共度时光。

CiteAb 的创始人 Andrew Chalmers 博士说:“我个人祝贺 Michael Browning 博士获得 CiteAb 终身成就奖。任何见过他的人都会对他为研究界改进抗体的热情和奉献精神印象深刻。这是在成就非凡的职业生涯之后当之无愧的奖项。我和整个 CiteAb 团队向布朗宁博士表示祝贺



PhosphoSolutions 自豪地宣布与戴维斯、加州抗体公司和 Aves Labs 建立新的合作伙伴关系,这两家公司是为研究界提供经过高度验证的抗体的两家供应商。

关于加入抗体

Antibodies Incorporated 成立于 1962 年,拥有近 500 种针对关键神经科学目标的小鼠单克隆抗体目录,其中许多已在小鼠大脑中进行了敲除验证。作为这一专业知识的延伸,Antibodies Incorporated 还提供了一套全面的抗体服务,专注于支持客户的发现工作。

抗锚蛋白-G来自抗体的抗 VGlut2
Anti-Ankyrin-G(染色)(N106/36)
使用 N106/36(红色)和 bIV-Spectrin 兔多克隆抗体(绿色)对成年大鼠皮层中的轴突起始段进行免疫荧光染色。图片由 Matt Rasband(贝勒医学院)提供。
Anti-VGlut2 (N29/29)
成年大鼠小脑的免疫荧光染色,其中 VGlut2(猫号 N29/29)为绿色,REEP2(猫号 N326D/2)为红色,Hoechst 核染色(蓝色)。

关于 Aves 实验室

Aves Labs 以其高引用鸡抗体目录而闻名于整个研究界。该目录主要集中在神经科学目标上,但也有非常流行的抗 GFP 抗体。研究人员不仅重视 Aves Labs 抗体的质量,还重视他们的定制鸡抗体服务。该公司开创了在蛋白质中寻找高免疫原性肽序列的新算法,开发了针对鸡抗体的新型亲和纯化方法,并且是世界领先的定制鸡抗体供应商。Aves 继续开发针对神经特异性抗原和表位标签的新型抗体试剂,以促进神经科学和细胞生物学界的科学进步。

抗酪氨酸羟化酶 (TYH)抗胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)

成年小鼠大脑黑质致密部多聚甲醛固定 (4%) 石蜡包埋切片的抗酪氨酸羟化酶 (TYH)免疫染色。这只老鼠被设计成在肌动蛋白启动子的控制下表达 GFP,这解释了低水平的绿色自发荧光。注意这个大脑区域中有大量的多巴胺能神经元细胞体。鸡抗体的检测来自德克萨斯红标记的山羊抗鸡 IgY (Jackson ImmunoResearch, 1:500)。
抗神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)
混合皮质小鼠脑培养物的神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 免疫染色 (RED)(Aves Labs,1:500 稀释)。二抗(Texas Red goat anti-chicken IgY)来自 Jackson ImmunoResearch)。蓝色是所有细胞核的 DAPI 染色,包括非 GFAP 阳性细胞。

现在提供更广泛的工具

随着 Antibodies Incorporated 和 Aves Labs 的加入,合并后的团队将能够为研究人员提供在多个物种中生产的更广泛的工具,以推进神经科学研究。随着研究人员不断突破界限,该团队将能够提供与之匹配的工具包,以及高度验证的试剂,这也为多重标记开辟了新的可能性。

来自团队领导

PhosphoSolutions 的 Mike Browning说:“在过去的二十年里,我们一直在努力将 PhosphoSolutions 打造成一家以客户为中心的科学家公司,致力于用最好的工具帮助研究界。我很高兴与 Antibodies Inc 和 Aves 合作,因为他们的高质量抗体为我们的产品提供了完美的补充。Aves 的鸡抗体为我们提供了优势,可以为我们许多被引用最多的抗体提供双标签机会。此外,Antibodies Inc 的单克隆抗体极大地扩展了我们目前的神经科学覆盖范围。我渴望看到我们所有的公司共同成长。”

自公司成立以来一直在公司工作的总裁克里斯汀尼克松将继续管理 PhosphoSolutions。她说:“我很高兴与我们领域内两个受人尊敬的品牌 Antibodies Incorporated 和 Aves Labs 建立合作伙伴关系,并很高兴与他们合作,向他们的客户介绍 PhosphoSolutions 产品和服务,并为我们提供出色的产品。我们期待着他们的支持,继续为研究人员提供推进其领域所需的高质量试剂。”

Antibodies 总裁 Will Fry说:“我们非常高兴 PhosphoSolutions 的科学家加入我们的团队。他们出色的抗体产品大大增加了我们的产品。他们与我们一样专注于为客户提供最优质的产品以推进他们的研究。我们的组合产品组合使研究人员能够从他们可以信赖的供应商那里获得广泛使用、经过高度验证的抗体。我们期待在不久的将来提供 PhosphoSolutions 产品并向客户推出新产品和服务。”



有效的定制多克隆抗体!

PhosphoSolutions将在制作和测试您的定制多克隆抗体的整个过程中与您同在。Michael Browning 博士在设计和生产磷酸化特异性抗体方面拥有超过三十年的经验,负责 PhosphoSolutions 免疫肽的设计。此外,我们还是多克隆磷酸化抗体纯化和表征方面的专家。我们所做的不仅仅是从您的兔子身上收集和发送血清。我们自己筛选血清,寻找最高滴度的出血。然后我们在用免疫肽制成的亲和柱上纯化抗体,并在 ELISA 中表征抗体以检查磷酸化特异性。在您收到用于测试的抗体后,我们将继续与您合作以优化您的信号并取得成功。

肽设计

定制抗体开发的关键第一步是肽设计。抗体的特异性和效用主要取决于免疫肽。作为肽设计过程的一个例子,请考虑下图,说明酪氨酸羟化酶中丝氨酸 40 的磷酸肽。磷酸丝氨酸的 N 端和 C 端序列显示在图的中间,而肽设计显示在底部。

定制抗体的肽段设计

设计该肽的基本原理如下:

截短的 N 端序列:首先,肽具有截短的 N 端序列。这样做是为了消除与 Blast 搜索中鉴定的同源蛋白质的交叉反应。

短序列的使用:第二,肽设计的另一个特点是使用非常短的序列,它迫使磷酸丝氨酰残基进入抗体识别的表位。

C-末端的酰胺化第三,鉴于肽的非常有利的两亲特性,C-末端被酰胺化以更好地模拟天然酪氨酸羟化酶蛋白。这种修饰可以提高蛋白质印迹中的免疫反应性,尤其是在免疫组织化学应用中。

添加N 端半胱氨酰残基最后,添加 N 端半胱氨酰残基以与载体蛋白结合并与亲和柱偶联。


抗体纯化

三种抗体可能性:用磷酸肽免疫后,兔子的免疫反应中可以产生三种抗体。如下图 1 所示,第一个是所需的磷酸化特异性抗体。然而,如果兔中的磷酸酶使注射的肽缀合物去磷酸化,也可以产生对肽的去磷酸形式特异的抗体。最后,可以针对不涉及表位中的磷酰基的肽的序列/构象产生泛特异性抗体。无论蛋白质的磷酸化状态如何,这些抗体都会与蛋白质发生反应。分离所需磷酸化特异性抗体的唯一方法是通过连续的磷酸化和去磷酸化层析。

泛、磷酸化和去磷酸化抗体生产图1

磷酸化特异性抗体的分离:我们使用的第一列是磷酸肽亲和柱(见图 2)。我们首先从血清中制备 IgG 级分,并将其应用于我们的磷酸肽亲和柱。我们之前描述的三种抗体中的两种将与此列结合。首先,磷酸化特异性抗体(蓝色)将结合,因为该柱上存在磷酸肽。泛特异性抗体(红色)也将结合,因为它识别的肽序列也存在于该列上。不会与该色谱柱结合的一种抗体是对肽的脱磷形式(绿色)具有特异性的抗体,因为该形式的肽不存在于色谱柱上。这些后面的抗体在流通中通过柱子,连同从兔血清中分离的额外 IgG 的完整补充。保存这些“流通”抗体,然后从磷酸肽亲和柱上洗脱磷酸化和泛特异性抗体。

磷酸化柱上的磷酸化特异性抗体纯化图2

然后将洗脱的磷酸和泛特异性抗体应用于去磷酸肽亲和柱。只有泛特异性抗体与该柱结合,因为存在泛特异性肽序列而不是磷酸肽。磷酸化特异性抗体不会与色谱柱结合,而是在流通液中(见图 3)。虽然流出液含有所需的磷酸化特异性抗体并被保存,但泛特异性抗体可以被洗脱并保存(如果它们存在)。

去磷酸肽亲和柱图 3

Western 和 IHC 中的表征

蛋白质印迹的特异性

下面图 1 中的复合蛋白质印迹显示了我们突触蛋白泛抗体的特征双联体以及我们的三个磷酸化突触蛋白抗体,并展示了抗体特异性的两个非常重要的方面。首先,大鼠脑匀浆中没有抗体标记的交叉反应带。其次,通过将未经处理的大鼠脑匀浆(左)与相同的匀浆(但在凝胶上运行之前已用 lambda 和碱性磷酸酶处理过)(右)中的信号进行比较,明确证明了磷酸化特异性。磷酸酶处理对泛抗体的信号没有影响,但完全消除了磷酸化抗体的免疫标记。

蛋白质印迹中的突触蛋白磷酸化特异性图1

免疫组化

现在我们转向免疫组织化学。我们的许多抗体都经过 IHC 测试。下面的图 2 显示了用绿色抗突触蛋白泛抗体染色培养的神经元(左)和用抗突触蛋白 Ser 549(右)染色的 C57 小鼠纹状体细胞

在 IHC 中验证的突触蛋白抗体图2

下面的图 3 说明了我们的 pan-TH 抗体在这张视网膜显微照片中的广泛标记(左)。相比之下,在这个光刺激的视网膜示例(右)中,磷酸化 TH 抗体仅选择性标记两个无长突细胞。

在 IHC 中验证的酪氨酸羟化酶抗体图 3





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